BTB液是溴麝香草酚藍指示劑，短時間使用此指示劑對魚無毒害作用。BTB遇CO2(實際上是BTB與H2CO3中的H+反應)后由藍色變成黃色。

驗證實驗的具體操作步驟是：取甲、乙兩只大燒杯，分別注入等量的清水，在兩只燒杯中各滴入數滴0.1%的BTB液，使溶液呈藍色。再取一條小魚放入甲燒杯中。20～30 min后觀察甲、乙兩燒杯中水色的變化。在甲燒杯中由于小魚呼吸作用釋放出的CO2，使水中的BTB液由藍色變為黃色，而乙燒杯中無顏色變化。

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